分子生物學（原書第五版）[美] Robert F. Weaver【附贈原書彩圖】

出版社： 科學出版社

ISBN：9787030368539

版次：1

包裝：平裝

開本：16開

用紙：膠版紙

頁數：944

編輯推薦

適讀族群 ：生命科學、醫學專業的大學部學生、研究生、研究人員

Robert F. Weaver的《分子生物學》一書歷經十餘年，並已更新至第五版。 **版本秉持了本書的優良傳統，特色鮮明、內容詳盡，圖文並茂，易讀易記。突出的特點是本書極富邏輯性，編寫人性化，每個結論都由具體實驗得出，這不僅讓讀者記住了實驗方法，更可以感受到分子生物學的精妙與美。此中文版排版清晰、美觀，並贈送包含原始彩圖的光盤。 《分子生物學》第五版將是分子生物學領域內較好的參考書。

內容簡介

《分子生物學（原書第五版）》不僅及時增添了學科發展的全新成果與進展，而且對全書的圖示與圖解進行了更加清晰，更為明了的設計與闡釋。 《分子生物學（原書第五版）》凸現的很大特色是，對每一分子生物學結論的介紹都是透過對實驗的設計、對結果的分析而逐步展開的。全書以原始研究論文為基礎，文字通俗流暢，敘述由淺入深，每一章都以提出科學問題、展開研究過程開始，以提供思考習題、推薦閱讀文獻結束，很適合學生的閱讀與理解，更利於知識的鞏固與提升。讀者受益的不僅是準確地掌握了分子生物學的基本理論和學科前沿，更為重要的是受到進行分子生物學理論研究的方法、思維、邏輯與分析的啟蒙和創新能力的提升。

目錄

譯者序

序言

致謝

分子生物學實驗技術目錄

第Ⅰ部分 導論

第1章 分子生物學簡史

1.1 傳遞遺傳學

孟德爾的遺傳定律

遺傳的染色體理論

遺傳重組和遺傳定位

重組的物理學證據

1.2 分子遺傳學

DNA的發現

基因和蛋白質之間的關係

基因的行為

1.3 生命的三個域

第2章 基因的分子特性

2.1 遺傳物質的特性

細菌轉化

多核苷酸的化學本質

2.2 DNA結構

實驗背景

雙螺旋

2.3 RNA基因

2.4 核酸的物理化學性質

DNA結構的多樣性

不同大小和形狀的DNA

第3章 基因功能簡介

3.1 儲存訊息

基因表現的整體過程

蛋白質結構

蛋白質功能

信使RNA的發現

轉錄

翻譯

3.2 複製

3.3 突變

鐮狀細胞貧血症

Ⅱ部分 分子生物學方法

第4章 分子克隆方法

4.1 基因克隆

限制性內切核酸酶的作用

載體

以特異性探針鑑定目的克隆

cDNA克隆

cDNA末端快速擴增

4.2 聚合酶連鎖反應

標準PCR

用反轉錄酶PCR進行cDNA克隆

實時定量PCR

4.3 表達克隆基因的方法

表達載體

其他真核載體

利用Ti質粒將基因導入植物

第5章 研究基因和基因活性的分子工具

5.1 分子的分離

凝膠電泳

雙向凝膠電泳

離子交換層析

凝膠過濾層析

親和層析

5.2 示踪標記

放射自顯影

磷屏成像

液體閃爍計數器

非放射性示蹤

5.3 核酸雜交的應用

Southern印跡：鑑定特異DNA片段

DNA指紋和DNA分型

DNA指紋和DNA分型在法醫學的應用

原位雜交：基因在染色體中的定位

免疫印跡（Western印跡）

5.4 DNA定序與物理圖

Sanger鏈末端終止定序法

自動化DNA定序

高通量定序

限制圖

5.5 基於克隆基因的蛋白質工程：定點誘變

5.6 圖譜定位與轉錄物定量

Northern印跡

S1核酸酶作圖

引子延伸法

截斷轉錄和無G盒轉錄

5.7 測定體內轉錄速率

細胞核連綴轉錄

報告基因轉錄

測定體內蛋白質積累

5.8 分析DNA－蛋白質交互作用

濾膜結合

凝膠阻滯

DNA酵素足跡

DMS足跡法和其他足跡法

染色質免疫沉澱（ChIP）

5.9 蛋白質－蛋白質交互作用研究

5.10 尋找與其他分子相互作用的RNA序列

SELEX

功能SELEX

5.11 基因敲除與轉基因

基因敲除小鼠

基因改造小鼠

Ⅲ部分 原核生物的轉錄

第6章 細菌的轉錄機制

6.1 RNA聚合酶的結構

σ亞基是一種特異性因子

6.2 啟動子

RNA聚合酶與啟動子的結合

啟動子結構

6.3 轉錄起始

σ因子促進轉錄起始

σ因子的再利用

σ循環的隨機模型

啟動子處DNA的局部解鏈

啟動子清除

σ因子的結構與功能

α亞基在UP元件辨識中的功能

6.4 延伸

核心酵素在延伸過程中的作用

延伸複合體的結構

6.5 轉錄的終止

Rho非依賴型終止

Rho依賴型終止

第7章 操縱子：細菌轉錄的精細調控

7.1 lac操縱子

lac操縱子的負調控

操縱子的發現

阻遏物與操縱基因間的相互作用

阻遏機制

lac操縱子的正調控

CAP的作用機制

7.2 ara操縱子

ara操縱子的阻遏環

ara操縱子阻遏環的證據

araC的自主調節

7.3 trp操縱子

色氨酸在trp操縱子負調控中的作用

衰減作用對trp操縱子的調控

衰減作用的失效

7.4 核糖開關

第8章 細菌轉錄機制的主要轉換模式

8.1 σ因子的轉換

噬菌體感染

孢子形成

擁有多啟動子的基因

其他σ因子的轉換

抗σ因子

8.2 T7噬菌體所編碼的RNA聚合酶

8.3 λ噬菌體對E.coli的感染

λ噬菌體的裂解繁殖

溶源態的建立

溶源期cI基因的自我調節

被λ噬菌體感染後寄主命運的決定：裂解或溶源

溶源菌的誘導

第9章 細菌中DNA－蛋白質的相互作用

9.1 λ阻遏物家族

利用定點突變探測結合的特異性

λ阻遏物－操縱基因交互作用的高解析度分析

434噬菌體阻遏物－操縱基因交互作用的高解析度分析

9.2 trp阻遏物

色氨酸的作用

9.3 對蛋白質－DNA交互作用的一般性認識

四個不同鹼基對的氫鍵形成能力

多聚DNA結合蛋白的重要性

9.4 DNA結合蛋白：遠端作用

Gal操縱子

重複的λ操縱基因

增強子

Ⅳ部分 真核生物的轉錄

第10章 真核生物的RNA聚合酶及其啟動子

10.1 真核生物RNA聚合酶的多種形式

三類細胞核聚合酶的分離

三類RNA聚合酶的作用

RNA聚合酶亞基結構

10.2 啟動子

Ⅱ類啟動子

Ⅰ類啟動子

Ⅲ類別啟動子

10.3 增強子與沉默子

增強子

沉默子

第11章 真核生物中的通用轉錄因子

11.1 Ⅱ類因子

Ⅱ類預起始複合物

TFIID的結構與功能

TFIIB的結構與功能

TFIIH的結構與功能

中介物複合體和RNA聚合酶Ⅱ全酶

延伸因子

11.2 I類因子

核心結合因子

UPE結合因子

SL1的結構與功能

11.3 Ⅲ類因子

TFIIIA

TFIIIB和TFIIIC

TBP的作用

第12章 真核生物的轉錄活化因子

12.1 激活因子的類型

DNA結合域

轉錄活化域

12.2 活化因子DNA結合模體的結構

鋅指結構

GAL4蛋白

細胞核受體

同源異型域

亮氨酸拉鍊和螺旋－環－螺旋域

12.3 活化因子各功能域的獨立性

12.4 活化因子的功能

TFIID的募集作用

聚合酶全酶的募集

12.5 活化因子間的相互作用

二聚化作用

遠程作用

轉錄工廠

複合增強子

結構轉錄因子

增強體

絕緣子

12.6 轉錄因子的調控

輔激活因子

活化因子的泛素化

活化因子的SUMO修飾

活化因子的乙醯化

訊號傳導途徑

第13章 染色質結構及其對基因轉錄的影響

13.1 染色質結構

組蛋白

核小體

30nm纖絲

染色質折疊的更高級結構

13.2 染色質結構與基因活性

組蛋白對Ⅱ類基因轉錄的影響

核小體定位

組蛋白乙醯化

組蛋白去乙醯化

染色質重建

異染色質與沉默

核小體與轉錄的延伸

第Ⅴ部分 轉錄後加工

第14章 RNA加工I：剪接

14.1 斷裂基因

有關斷裂基因的證據

RNA剪接

……

Ⅶ部分 DNA複製、重組與轉座

第Ⅷ部分 基因組

現代分子生物學技術與實驗技巧

出版社：化學工業出版社

ISBN：9787122446589

版次：2

包裝：精裝

開本：16開

出版時間：2024-07-01

用紙：膠版紙

頁數：499

編輯推薦

一版廣受歡迎，新版維持一版內容特色。系統介紹現代分子生物學各種傳統和新型的實驗技術，新版增加了CRISPR基因編輯技術、長鏈非編碼RNA研究實驗技術等新內容，並對非編碼RNA資料庫及線上工具一章進行重寫。實驗方案部分強調對實驗結果作具體分析，每個實驗結果都附圖（照片），圖中設陰陽性對照，對照圖對實驗結果進行詳細分析，使讀者對實驗結果一目了然，還指出了每個技術的難點和解決辦法。

分子生物學工作者案頭常備實驗手冊工具書。

內容簡介

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新版增加了CRISPR基因編輯技術、長鏈非編碼RNA研究實驗技術等新內容，並對非編碼RNA資料庫及線上工具章節進行重寫。和一版一樣，實驗方案部分強調對實驗結果作具體分析，每個實驗結果都附圖（照片），圖中設陰陽性對照，對照圖對實驗結果進行詳細分析，使讀者對實驗結果一目了然，也指出了每個技術的困難和解決辦法。

本書是生物、醫學領域相關實驗室的案頭實驗操作工具書，可供從事生命科學研究和教育的碩士、博士等科技工作者和教學一線教師日常查閱參考。

目錄

第一章分子生物學技術概述1

一、引言1

二、目的基因的獲取1

三、克隆載體的選擇2

四、載體的轉化2

五、重組子的篩選3

六、基因表現4

七、生物工程技術的應用5

參考文獻6

第二章核酸萃取技術7

第一節質粒DNA的萃取7

一、引言7

二、鹼裂解法小量質粒萃取所需的儀器、材料及基本步驟8

三、Promega質粒DNA小量萃取試劑盒操作程序9

四、注意事項9

五、實驗結果說明10

六、疑難解析10

第二節基因組DNA的萃取12

一、引言12

二、從植物組織萃取基因組DNA13

三、從動物組織萃取基因組DNA14

四、細菌基因組DNA的製備14

五、用DNA萃取試劑盒從全血和組織中萃取基因組DNA15

六、注意事項17

七、實驗結果說明17

八、疑難解析18

第三節RNA的萃取19

一、引言19

二、實驗設計思路與基本步驟20

三、實驗結果說明24

四、疑難解析24

參考文獻25

第三章目的基因的取得及鑑定技術26

第一節普通PCR26

一、普通PCR的基本概念與原理26

二、普通PCR技術的實驗方法27

三、疑難解析32

第二節實時螢光定量PCR33

一、即時螢光定量PCR的基本概念與原理33

二、即時螢光定量PCR的定量方法36

三、即時螢光定量PCR的實驗方法42

四、即時螢光定量PCR技術的應用47

五、疑難解析53

第三節環介導等溫擴增法快速檢測病原菌55

一、引言55

二、環介導等溫核酸擴增的原理57

三、實驗設計思路與基本步驟59

四、實驗結果66

五、疑難排解69

六、小結70

參考文獻72

第四章載體的建構與鑑定76

第一節克隆載體76

一、pBR322載體76

二、pUC8——一種Lac選擇型質粒78

三、pGEM3Z——克隆DNA的體外轉錄78

四、柯斯質粒載體78

第二節表達載體79

一、原核表達載體80

二、真核表達載體82

第三節載體建構中的關鍵工具與步驟87

一、關鍵工具87

二、常規複製關鍵步驟89

三、同源重組克隆關鍵步驟91

第四節載體建構的應用舉例92

一、常規克隆實驗材料92

二、常規克隆實驗方法93

三、同源重組克隆實驗材料97

四、同源重組克隆實驗方法98

五、疑難題解析100

參考文獻100

第五章細菌轉化與細胞轉染技術102

第一節細菌轉化102

一、基本原理102

二、實驗設計思路與基本步驟103

三、實驗結果及分析104

四、疑難解析104

第二節細胞轉染105

一、基本原理106

二、實驗設計與基本步驟108

三、實驗結果及分析110

四、疑難解析111

參考文獻112

第六章外源基因表現的鑑定113

第一節Northern Blot113

一、引言113

二、實驗設計思路與基本步驟113

三、實驗結果說明116

四、疑難解析117

第二節RT-PCR117

一、引言117

二、實驗設計思路與基本步驟117

三、實驗結果說明120

四、疑難解析120

第三節Western Blot121

一、引言121

二、實驗設計思路與基本步驟121

三、實驗結果說明126

四、疑難解析126

第四節ELISA127

一、引言127

二、實驗設計思路與基本步驟129

三、實驗結果說明131

四、疑難解析131

參考文獻132

第七章報告基因分析134

第一節報告基因的定義與種類134

一、報告基因的定義134

二、常用的報告基因134

第二節應用報告基因分析基因的轉錄活性135

一、實驗原理135

二、實驗設計與基本步驟136

三、實驗結果分析137

四、疑難解析140

第三節報告基因在動物活體影像的應用140

一、實驗原理140

二、實驗設計與基本步驟142

三、實驗結果分析143

四、疑難解析143

參考文獻145

第八章差異基因表現譜分析147

第一節基於雙向電泳技術的蛋白質體學分析147

一、引言147

二、實驗基本步驟及注意事項147

三、雙向電泳實驗結果說明及疑難解析154

四、質譜資料分析說明及疑難解析154

五、結語159

第二節基因晶片160

一、引言160

二、工作原理161

第三節基因晶片的製備163

一、概述163

二、探針的選擇與製備163

三、基因晶片基片的選擇與準備165

四、基因晶片的製作166

第四節基因晶片的檢測168

一、基因晶片的雜交及數據取得168

二、基因晶片分析常用的軟體及資料庫169

第五節基因晶片的應用170

一、基因晶片與病原微生物檢測170

二、基因晶片與腫瘤172

三、基因晶片與藥物研發174

四、結語176

參考文獻176

第九章蛋白質-核酸交互作用技術178

第一節凝膠遷移實驗178

一、引言178

二、實驗設計與基本步驟179

三、實驗舉例與結果說明184

四、需要注意的問題186

第二節染色質免疫共沉澱技術187

一、引言187

二、實驗基本步驟188

三、實驗舉例189

四、實驗注意事項192

第三節RNA沉降192

一、實驗基本原理192

二、實驗基本思路192

三、實驗舉例說明197

第四節RIP實驗198

一、實驗基本原理198

二、實驗思路199

三、注意事項200

四、實驗舉例說明201

參考文獻201

第十章蛋白質-蛋白質交互作用技術202

第一節運用酵母雙雜交技術篩選與標靶蛋白相互作用的蛋白質202

一、引言202

二、實驗儀器及材料203

三、實驗設計流程204

四、實驗方法204

五、實驗結果說明210

六、疑難解析214

第二節GST沉降214

一、實驗基本原理214

二、實驗基本步驟215

三、實驗舉例217

四、實驗注意事項221

第三節免疫共沉澱222

一、引言222

二、實驗設計與基本步驟223

三、實驗結果舉例225

四、需要注意的問題227

第四節細胞共定位228

一、引言228

二、實驗設計與基本步驟228

三、實驗結果舉例說明229

四、實驗注意事項230

參考文獻231

第十一章微生物體內同源重組技術232

第一節傳統的大腸桿菌體內同源重組方法（RecA重組系統）232

一、引言232

二、利用RecA重組系統建構痢疾桿菌hns基因插入突變體232

三、RecA重組系統建構突變體的其他方法235

四、存在的問題和解決方法236

五、小結236

第二節Red/ET重組系統237

一、引言237

二、痢疾桿菌hns基因缺失突變體的建構238

三、Red同源重組技術應用策略241

四、應用Gap-Repair克隆技術建構pBR322-Red載體242

五、Red/ET重組系統的其他應用244

六、小結245

參考文獻245

第十二章基因改造動物技術247

第一節基因改造動物概述247

一、基因改造動物的概念247

二、基因改造動物的分類247

三、基因改造動物的命名248

四、基因改造動物技術的基本原理249

五、基因改造動物的安全性與倫理學問題250

六、基因改造動物技術的發展概況251

第二節顯微注射法製備基因改造動物252

一、儀器設備及材料及試劑252

二、實驗動物準備253

三、基因改造動物製備方法254

四、影響基因改造動物產生效率的因素257

第三節利用ES細胞製備基因改造動物258

一、ES細胞的研究歷史258

二、ES細胞的生物特性258

三、ES細胞分離培養的基本方法259

四、ES細胞的遺傳修飾263

五、基因改造動物製備270

參考文獻271

第十三章基因編輯技術272

第一節基因打靶技術273

一、基因打靶技術的原理273

二、利用同源重組建構基因打靶動物模型的基本步驟273

三、基因打靶的策略276

四、基因打靶的生物學意義與應用前景287

第二節CRISPR/Cas9系統288

一、CRISPR/Cas系統的簡介及其作用原理288

二、TypeⅡ CRISPR/Cas9系統289

三、CRISPR/Cas9基因編輯技術的應用範例291

四、CRISPR/Cas9基因編輯技術的應用前景295

第三節CRISPR/Cas13系統296

一、CRISPR/Cas13系統的介紹296

二、實驗基本步驟296

三、注意事項298

四、實驗結果說明298

五、疑難排解300

參考文獻300

第十四章流式細胞儀實驗方法305

一、引言305

二、實驗方法308

三、實驗結果分析313

四、流式細胞分析的品質控制323

參考文獻325

第十五章幹細胞的分離培養與誘導分化327

第一節人類胎盤來源間質幹細胞的分離培養與純化327

一、引言327

二、材料、試劑與主要儀器設備328

三、實驗方法329

四、實驗結果332

五、注意事項337

第二節小鼠間質幹細胞的分離培養與純化338

一、引言338

二、骨髓法339

三、密質骨法339

第三節人類胚胎幹細胞的培養348

一、引言348

二、實驗材料348

三、實驗方法348

四、注意事項352

第四節CD34+造血幹細胞與CD14+單核細胞向樹突細胞的誘導分化353

一、引言353

二、實驗材料與方法354

三、實驗結果357

四、注意事項359

參考文獻359

第十六章微RNA的構造及實驗技術364

第一節miRNA克隆364

一、材料與設備365

二、實驗方法365

三、疑難排解368

第二節miRNA Northern Blot368

一、材料與設備368

二、實驗方法369

三、疑難排解369

第三節miRNA原位雜交370

一、材料與設備370

二、實驗方法371

三、疑難解析371

第四節基於poly（A）加尾的miRNA RT-PCR372

一、材料與設備372

二、實驗方法373

三、疑難排解374

第五節miRNA功能研究375

一、miRNA表達檢測375

二、miRNA功能篩選鑑定376

三、miRNA標靶基因鑑定377

四、miRNA非經典功能378

第六節siRNA的構造及實驗研究379

一、引言379

二、如何進行RNAi實驗381

三、常用RNAi實驗的基本步驟384

四、實驗結果說明388

五、疑難排解389

參考文獻390

第十七章長鏈非編碼RNA研究實驗技術392

第一節lncRNA克隆392

一、材料與設備393

二、實驗方法393

三、實驗注意事項396

第二節lncRNA Northern Blot396

一、材料與設備396

二、實驗方法396

三、實驗注意事項397

第三節lncRNA原位雜交398

一、材料與設備398

二、實驗方法398

三、實驗注意事項399

第四節lncRNA定量檢測400

一、材料與設備400

二、實驗方法400

三、實驗注意事項400

第五節lncRNA-蛋白質互作研究技術401

一、RNA pull-down鑑定特定lncRNA結合的蛋白質401

二、RIP鑑定特定蛋白質結合的lncRNA免疫沉澱技術404

三、CLIP鑑定蛋白質與lncRNA的結合位點405

四、ChIRP鑑定與lncRNA結合的蛋白質/DNA408

參考文獻412

第十八章非編碼RNA資料庫及線上分析工具介紹414

第一節綜合性非編碼RNA資料庫414

一、概論414

二、非編碼RNA相關資料庫415

三、小結425

第二節miRNA相關資料庫及預測工具425

一、概論425

二、miRNA相關資料庫425

三、miRNA相關預測工具434

四、小結442

第三節rRNA相關資料庫及預測工具442

一、概述442

二、rRNA相關資料庫442

三、rRNA相關預測工具448

四、小結449

第四節sRNA相關資料庫及預測工具450

一、概述450

二、sRNA相關資料庫450

三、sRNA標靶相關預測工具452

四、小結454

第五節siRNA相關資料庫454

一、概述454

二、siRNA相關資料庫454

第六節tRNA相關資料庫及預測工具460

一、概述460

二、tRNA相關資料庫460

三、tRNA相關預測工具470

四、小結472

第七節snoRNA相關資料庫及預測工具472

一、概述472

二、snoRNA相關資料庫472

三、snoRNA相關預測工具473

四、小結476

第八節lncRNA及circRNA相關資料庫477

一、概論477

二、lncRNA及circRNA相關資料庫477

三、小結497

參考文獻498